Головна Головна -> Реферати українською -> Дисертації та автореферати -> реферат українською мовою: Індукція каталітичної активності плазміногену моноклональним антитілом IV-1c

Індукція каталітичної активності плазміногену моноклональним антитілом IV-1c / сторінка 13

Назва:
Індукція каталітичної активності плазміногену моноклональним антитілом IV-1c
Тип:
Реферат
Мова:
Українська
Розмiр:
21,83 KB
Завантажень:
151
Оцінка:
 
поточна оцінка 5.0

Скачати цю роботу безкоштовно
Пролистати роботу: 1  2  3  4  5  6  7  8  9  10  11  12  13  14 
Одним из путей активации плазминогена является так называемый “непрямой”, когда экспозиция активного центра достигается вследствие конформационной перестройки молекулы профермента без расщепления активационной связи, то есть без образования плазмина. К “непрямым” или негидролитическим активаторам относятся, в частности, продуцируемые патогенными микроорганизмами стрептокиназа (стрептококки) и стафилокиназа (стафилококки). Они демонстрируют высокое сродство к протеиназному домену плазминогена и способны образовывать активаторные комплексы, то есть модифицировать активный центр протеиназы таким образом, что он приобретает способность (до этого не присущую ни плазминогену, ни плазмину) расщеплять Арг561-Вал562 связь молекулы плазминогена, приводя к его активации и образованию плазмина. Другой особенностью их действия есть способность к индукции каталитической активности в локусе активного центра плазминогена без расщепления активационной связи исключительно за счет конформационных изменений молекулы. Поскольку термин “активация” профермента обычно применяют в случае каталитического пути активации, для негидролитического пути был предложен термин “индукция каталитической активности”.
Целью данной работы явилось изучение процесса индукции каталитической активности в проферментах сериновых протеиназ на модели плазминоген-антиплазминогеновое моноклональное антитело IV-1c.
В работе было использовано моноклональное антиплазминогеновое антитело IV-1c, способное вызывать конформационные изменения молекулы плазминогена, которые приводят к индукции каталитической активности профермента. Антиплазминогеновое моноклональное антитело IV-1c относится к иммуноглобулинам изотипа IgG1, который, как и изотипы IgG2a, IgG2b мышей и IgG1 человека характеризуется наличием С-концевого лизина в g-цепях, а также остатков лизина в 459 и 207 положениях k-цепей. Эпитоп моноклонального антитела IV-1c Вал709-Гли718 локализован в протеиназном домене плазминогена. Известно, что именно этот участок принимает участие в индукции каталитической активности плазминогена стрептокиназой. Процесс индукции каталитической активности плазминогена моноклональным антителом IV-1c, в отличие от стрептокиназы, начинается лишь после длительного лаг-периода. Антиплазминогеновое моноклональное антитело IV-1c не проявляет свойств каталитических антител. Индукция каталитической активности плазминогена моноклональным антителом IV-1c подавляется 6-аминогексановой кислотой – лигандом крингловых структур плазминогена.
В результате проведенных экспериментов исследован механизм индукции каталитической активности плазминогена моноклональным антителом IV-1c и обоснована возможность использования моноклональных антител соответствующей специфичности как модели изучения таких механизмов.
Изучено влияние физико-химических факторов на процесс индукции каталитической активности, определена стабильность комплекса и основные параметры процесса индукции. Продемонстрирована зависимость скорости индукции от концентрации протонов в среде. Продемонстрирована необходимость перехода Глу-плазминогена в открытую, Лиз-подобную конформацию, на начальной стадии процесса индукции. Установлена зависимость процесса от катионного состава среды. С помощью определения энергии активации процесса продемонстрировано наличие значительных конформационных перестроек комплекса плазминоген-IV-1c, которые предшествуют индукции каталитической активности. При исследовании ингибирования индукции физиологическим ингибитором плазмина a2-антиплазмином показано наличие экспонированной в молекуле плазминогена “классической” каталитической триады (Сер-Гис-Асп) активного центра плазмина уже в начале быстрой (второй) фазы реакции индукции каталитической активности. На основе исследования механизмов индукции каталитической активности плазминогена моноклональным антителом IV-1c предложена схема реакции, которая, видимо, является универсальной для активаторов непрямого действия. Схему можно представить как ряд реакций, которые происходят в основном последовательно: образование комплекса Глу-плазминоген-моноклональное антитело IV-1c по механизму взаимодействия антитела с эпитопом (Вал709-Гли718), переход плазминогена к Лиз-подобной конформации, взаимодействие лизин-связывающего участка плазминогена с С-концевым остатком лизина g-цепи антитела, экспозиция активного центра, способного расщеплять активационную связь молекулы плазминогена.

Завантажити цю роботу безкоштовно

Пролистати роботу: 1  2  3  4  5  6  7  8  9  10  11  12  13  14 
Реферат на тему: Індукція каталітичної активності плазміногену моноклональним антитілом IV-1c

BR.com.ua © 1999-2019 | Реклама на сайті | Умови використання | Зворотній зв'язок