Загрузка...
Головна Головна -> Реферати українською -> Дисертації та автореферати -> Скачати реферат: РЕГУЛЯЦІЯ ДОЗРІВАННЯ ООЦИТІВ ТА ВІДТВОРЮВАЛЬНОЇ ФУНКЦІЇ КОРІВ ПРИ ДІЇ ГОРМОНІВ IN VITRO ТА IN VIVO

Загрузка...

РЕГУЛЯЦІЯ ДОЗРІВАННЯ ООЦИТІВ ТА ВІДТВОРЮВАЛЬНОЇ ФУНКЦІЇ КОРІВ ПРИ ДІЇ ГОРМОНІВ IN VITRO ТА IN VIVO / сторінка 4

Назва:
РЕГУЛЯЦІЯ ДОЗРІВАННЯ ООЦИТІВ ТА ВІДТВОРЮВАЛЬНОЇ ФУНКЦІЇ КОРІВ ПРИ ДІЇ ГОРМОНІВ IN VITRO ТА IN VIVO
Тип:
Реферат
Мова:
Українська
Розмiр:
16,70 KB
Завантажень:
333
Оцінка:
 
поточна оцінка 5.0
Загрузка...
Скачати цю роботу безкоштовно
Пролистати роботу: 1  2  3  4  5  6  7  8  9  10  11 

До культурального середовища під час інкубації ооцитів додавали гормони: 17–естрадіол у кількості 1; 4; 7; 10 мкг/мл, прогестерон – 0,1; 0,2; 0,3; 0,5 мкг/мл та їхні ліпосомальні емульсії (1 мкг/мл естрадіолу та 0,1 мкг/мл прогестерону), інсулін у кількості 0,025; 0,05; 0,075; 0,1; 0,2; 0,3; 0,4 ІО/мл, гідрокортизон – 0,5; 1,0; 1,5; 2,0; 2,5; 3,0; 5,0; 10; 50 мкг/мл, кортикотропін – 0,25; 0,5; 1,0; 2,0; 3,5; 4,0; 5,0 мкг/мл, преднізолон – 0,2; 0,4; 0,5; 0,6; 1,0; 2,0; 8,0 мкг/мл. Про вплив гормонів на синтез білка в ооцит-кумулюсних комплексах аналізували за ступенем включення [2-14С]аланіну в білки при їхній інкубації. Радіоактивність синтезованих білків визначали на рідинному сцинтиляційному лічильнику LKB (Швеція), використовуючи сцинтиляційну рідину ЖС-9. Інтенсивність включення радіоактивної мітки виражали в тис імп/хв на 1 мг білка.
Після встановлення оптимальної кількості гормонів під час дослідження їхнього впливу на розвиток ооцитів при додаванні до інкубаційного середовища досліджували комплексну дію на ооцит-кумулюсні комплекси. У дослідженнях використовували комплекс гормонів: інсулін 0,2 ІО/мл і естрадіол 4 мкг/мл; інсулін 0,1 ІО/мл і естрадіол 1,0 мкг/мл; естрадіол 1 мкг/мл і преднізолон 0,2 мкг/мл; естрадіол 4 мкг/мл і преднізолон 0,4 мкг/мл; інсулін 0,1 ІО/мл, естрадіол 1 мкг/мл, преднізолон 0,2 мкг/мл; інсулін 0,2 ІО/мл, естрадіол 4 мкг/мл, преднізолон 0,4 мкг/мл.
На другому етапі проведено дослід на статевозрілих телицях 16-20-місячного віку, стимуляцію статевої охоти в яких викликали шляхом уведення комплексних гормонально-вітамінних препаратів, що містять інсулін і преднізолон. Фолікуло- і оогенез у досліджуваних телиць викликали шляхом внутрішньом’язового введення їм гормонально-вітамінного препарату “Овоген“. В одній дозі цього препарату (10 мл) містилось: гонадотропін – 1000-1200 ІО, естрадіол дипропіонат – 0,75 мг, тестостерон пропіонат – 7,5 мг, вітаміни А – 7,5 тис ІО, D3 – 10 тис ІО, Е – 5,0 мг. Тварин, після синхронізації статевого циклу естрофаном в дозі 500 мкг, розділили на дві дослідні та контрольну групи по три голови у кожній. У лютеїнову фазу статевого циклу телицям усіх груп підшкірно вводили гормонально-вітамінні препарати у складі ліпосом. Телицям контрольної групи внутрішньом’язово вводили лише гормонально-вітамінний препарат “Овоген“. Телицям першої дослідної групи підшкірно вводили гормонально-вітамінний препарат “Овоген“, до якого додавали Б-інсулін SC пролонгованої дії в дозі 100 ІО/гол. Телицям другої дослідної групи підшкірно вводили гормонально-вітамінний препарат “Овоген“, до якого додавали преднізолон у дозі 50 мг/гол. Через 48 годин після цього тваринам внутрішньом’язово вводили естрофан у дозі 2 мл на голову. Тварин забивали на 7-й день статевого циклу. Для досліджень відбирали зразки ендометрію, яєчників, печінки, наднирників, які охолоджували до температури 2С. У стерильному боксі проводили морфологічну та морфометричну оцінку отриманих яєчників, з фолікулів аспірували ооцити та культивували їх протягом 24-х годин за вищезгаданою методикою. У біохімічних дослідженнях також використовували виділені з клітин досліджувальних тканин ядра і мітохондрії, в яких визначали вміст РНК та ДНК (Цанев Р.Г., Марков Г.Г., 1960). У сироватці крові визначали вміст загального білка за допомогою рефрактометра МРФ-22, співвідношення окремих білкових фракцій методом електрофорезу. Статистичну обробку одержаних цифрових даних проводили за допомогою оцінки вірогідності порівнювальних показників з обчисленням критерію Ст’юдента.
РЕЗУЛЬТАТИ ДОСЛІДЖЕНЬ ТА ЇХ ОБГОВОРЕННЯ
Вплив інсуліну на дозрівання ооцитів корів in vitro. Культивування ооцит-кумулюсних комплексів проводили в середовищі, що містило інсулін у кількості 0,025; 0,05; 0.075; 0,1; 0,2; 0,3; 0,4 ІО/мл. З’ясовано, що додавання до культурального середовища інсуліну в низьких концентраціях (0,025 ІО/мл) незначно впливало на рівень мейотичного дозрівання ооцитів та вміст в них РНК і ДНК, тоді як більш високі дози гормону (0,2, 0,3 ІО/мл) підвищують вихід повноцінних ооцитів (відповідно 76% і 82% ооцитів 1-ї катерогії, проти 64% в контролі) та викликають в ОКК інтенсивний поділ і наростання клітин кумулюсу, що вказує на дозрівання ооцитів до метафази ІІ та їхню здатність до запліднення та подальшого розвитку (Лобачова І.
Загрузка...

Завантажити цю роботу безкоштовно
Пролистати роботу: 1  2  3  4  5  6  7  8  9  10  11 
Реферат на тему: РЕГУЛЯЦІЯ ДОЗРІВАННЯ ООЦИТІВ ТА ВІДТВОРЮВАЛЬНОЇ ФУНКЦІЇ КОРІВ ПРИ ДІЇ ГОРМОНІВ IN VITRO ТА IN VIVO

BR.com.ua © 1999-2018 | Реклама на сайті | Умови використання | Зворотній зв'язок