Головна Головна -> Реферати українською -> Дисертації та автореферати -> Скачати реферат: РЕГУЛЯЦІЯ ДОЗРІВАННЯ ООЦИТІВ ТА ВІДТВОРЮВАЛЬНОЇ ФУНКЦІЇ КОРІВ ПРИ ДІЇ ГОРМОНІВ IN VITRO ТА IN VIVO

РЕГУЛЯЦІЯ ДОЗРІВАННЯ ООЦИТІВ ТА ВІДТВОРЮВАЛЬНОЇ ФУНКЦІЇ КОРІВ ПРИ ДІЇ ГОРМОНІВ IN VITRO ТА IN VIVO / сторінка 4

Назва:
РЕГУЛЯЦІЯ ДОЗРІВАННЯ ООЦИТІВ ТА ВІДТВОРЮВАЛЬНОЇ ФУНКЦІЇ КОРІВ ПРИ ДІЇ ГОРМОНІВ IN VITRO ТА IN VIVO
Тип:
Реферат
Мова:
Українська
Розмiр:
16,70 KB
Завантажень:
333
Оцінка:
 
поточна оцінка 5.0


Скачати цю роботу безкоштовно
Пролистати роботу: 1  2  3  4  5  6  7  8  9  10  11 

До культурального середовища під час інкубації ооцитів додавали гормони: 17–естрадіол у кількості 1; 4; 7; 10 мкг/мл, прогестерон – 0,1; 0,2; 0,3; 0,5 мкг/мл та їхні ліпосомальні емульсії (1 мкг/мл естрадіолу та 0,1 мкг/мл прогестерону), інсулін у кількості 0,025; 0,05; 0,075; 0,1; 0,2; 0,3; 0,4 ІО/мл, гідрокортизон – 0,5; 1,0; 1,5; 2,0; 2,5; 3,0; 5,0; 10; 50 мкг/мл, кортикотропін – 0,25; 0,5; 1,0; 2,0; 3,5; 4,0; 5,0 мкг/мл, преднізолон – 0,2; 0,4; 0,5; 0,6; 1,0; 2,0; 8,0 мкг/мл. Про вплив гормонів на синтез білка в ооцит-кумулюсних комплексах аналізували за ступенем включення [2-14С]аланіну в білки при їхній інкубації. Радіоактивність синтезованих білків визначали на рідинному сцинтиляційному лічильнику LKB (Швеція), використовуючи сцинтиляційну рідину ЖС-9. Інтенсивність включення радіоактивної мітки виражали в тис імп/хв на 1 мг білка.
Після встановлення оптимальної кількості гормонів під час дослідження їхнього впливу на розвиток ооцитів при додаванні до інкубаційного середовища досліджували комплексну дію на ооцит-кумулюсні комплекси. У дослідженнях використовували комплекс гормонів: інсулін 0,2 ІО/мл і естрадіол 4 мкг/мл; інсулін 0,1 ІО/мл і естрадіол 1,0 мкг/мл; естрадіол 1 мкг/мл і преднізолон 0,2 мкг/мл; естрадіол 4 мкг/мл і преднізолон 0,4 мкг/мл; інсулін 0,1 ІО/мл, естрадіол 1 мкг/мл, преднізолон 0,2 мкг/мл; інсулін 0,2 ІО/мл, естрадіол 4 мкг/мл, преднізолон 0,4 мкг/мл.
На другому етапі проведено дослід на статевозрілих телицях 16-20-місячного віку, стимуляцію статевої охоти в яких викликали шляхом уведення комплексних гормонально-вітамінних препаратів, що містять інсулін і преднізолон. Фолікуло- і оогенез у досліджуваних телиць викликали шляхом внутрішньом’язового введення їм гормонально-вітамінного препарату “Овоген“. В одній дозі цього препарату (10 мл) містилось: гонадотропін – 1000-1200 ІО, естрадіол дипропіонат – 0,75 мг, тестостерон пропіонат – 7,5 мг, вітаміни А – 7,5 тис ІО, D3 – 10 тис ІО, Е – 5,0 мг. Тварин, після синхронізації статевого циклу естрофаном в дозі 500 мкг, розділили на дві дослідні та контрольну групи по три голови у кожній. У лютеїнову фазу статевого циклу телицям усіх груп підшкірно вводили гормонально-вітамінні препарати у складі ліпосом. Телицям контрольної групи внутрішньом’язово вводили лише гормонально-вітамінний препарат “Овоген“. Телицям першої дослідної групи підшкірно вводили гормонально-вітамінний препарат “Овоген“, до якого додавали Б-інсулін SC пролонгованої дії в дозі 100 ІО/гол. Телицям другої дослідної групи підшкірно вводили гормонально-вітамінний препарат “Овоген“, до якого додавали преднізолон у дозі 50 мг/гол. Через 48 годин після цього тваринам внутрішньом’язово вводили естрофан у дозі 2 мл на голову. Тварин забивали на 7-й день статевого циклу. Для досліджень відбирали зразки ендометрію, яєчників, печінки, наднирників, які охолоджували до температури 2С. У стерильному боксі проводили морфологічну та морфометричну оцінку отриманих яєчників, з фолікулів аспірували ооцити та культивували їх протягом 24-х годин за вищезгаданою методикою. У біохімічних дослідженнях також використовували виділені з клітин досліджувальних тканин ядра і мітохондрії, в яких визначали вміст РНК та ДНК (Цанев Р.Г., Марков Г.Г., 1960). У сироватці крові визначали вміст загального білка за допомогою рефрактометра МРФ-22, співвідношення окремих білкових фракцій методом електрофорезу. Статистичну обробку одержаних цифрових даних проводили за допомогою оцінки вірогідності порівнювальних показників з обчисленням критерію Ст’юдента.
РЕЗУЛЬТАТИ ДОСЛІДЖЕНЬ ТА ЇХ ОБГОВОРЕННЯ
Вплив інсуліну на дозрівання ооцитів корів in vitro. Культивування ооцит-кумулюсних комплексів проводили в середовищі, що містило інсулін у кількості 0,025; 0,05; 0.075; 0,1; 0,2; 0,3; 0,4 ІО/мл. З’ясовано, що додавання до культурального середовища інсуліну в низьких концентраціях (0,025 ІО/мл) незначно впливало на рівень мейотичного дозрівання ооцитів та вміст в них РНК і ДНК, тоді як більш високі дози гормону (0,2, 0,3 ІО/мл) підвищують вихід повноцінних ооцитів (відповідно 76% і 82% ооцитів 1-ї катерогії, проти 64% в контролі) та викликають в ОКК інтенсивний поділ і наростання клітин кумулюсу, що вказує на дозрівання ооцитів до метафази ІІ та їхню здатність до запліднення та подальшого розвитку (Лобачова І.

Завантажити цю роботу безкоштовно
Пролистати роботу: 1  2  3  4  5  6  7  8  9  10  11 



Реферат на тему: РЕГУЛЯЦІЯ ДОЗРІВАННЯ ООЦИТІВ ТА ВІДТВОРЮВАЛЬНОЇ ФУНКЦІЇ КОРІВ ПРИ ДІЇ ГОРМОНІВ IN VITRO ТА IN VIVO

BR.com.ua © 1999-2017 | Реклама на сайті | Умови використання | Зворотній зв'язок