Головна Головна -> Реферати українською -> Дисертації та автореферати -> Скачати безкоштовно: Теоретичне обгрунтовування та експерИментальна перевірка ефективності швидкого двоступінчастого заморожування

Теоретичне обгрунтовування та експерИментальна перевірка ефективності швидкого двоступінчастого заморожування / сторінка 7

Назва:
Теоретичне обгрунтовування та експерИментальна перевірка ефективності швидкого двоступінчастого заморожування
Тип:
Реферат
Мова:
Українська
Розмiр:
18,21 KB
Завантажень:
360
Оцінка:
 
поточна оцінка 5.0

Скачати цю роботу безкоштовно
Пролистати роботу: 1  2  3  4  5  6  7  8  9  10  11 

Клітинну суспензію розводили водним розчином хлориду натрію у 10 разів і витримували в ньому протягом 10 хв, після чого центрифугували при 1000 обертах протягом 5 хв. Далі надосад видаляли, а осад розводили фізіологічним розчином. Результати експериментів узгоджуються з теоретичними прогнозами про те, що відмивання клітинної суспензії від кріопротектора поліпшується зі збільшенням концентрації не проникаючої в клітини речовини в розчині, що відмиває. При одноразовому відмиванні клітин 1,5М розчином кількість клітин знижувалася на 16,402,30%, а збереження на 27,684,11 і 20,553,11% за даними світлової і люмінесцентної мікроскопії. І хоча ці показники вірогідно і відрізнялися від контрольних величин, але в процентному відношенні вони були вищими, ніж при відмиванні 0,75М розчином, де кількість клітин зменшувалась на 34,372,51%, а збереження на 57,033,1% і 53,084,1%.
При вивченні клітинного складу кісткового мозку показано, що молярність розчину, що відмиває, відіграє важливу роль у збереженні трьох основних ростків кровотворення .(табл.2)
Таблиця 2
Клітинний склад кісткового мозку до і після швидкого двоступінчастого заморожування, відтавання й одноразового відмивання від кріопротектору
Тип клітин | Нативний кістковий мозок
(контроль) | Відмивання 1,5М
NaCl | Відмивання 0,75М
NaCl
Мієлобласти | 5,12±0,23 | 5,62±0,73 | 2,74±1,22
Мієлоцити | 3,41±0,34 | 3,01±0,52 | 2,12±1,71
Метамієлоцити | 7,81±0,72 | 7,12±1,11 | 6,21±1,12
Гранулоцити | 30,42±2,23 | 25,63±2,74 | 18,74±3,23
Мієлоїдний росток | 47,72±2,52 | 41,22±2,90
Р10,05 | 29,72 ±3,32
Р10,05 Р20,05
Еритробласти | 4,33±0,31 | 4,01±0,53 | 4,80±0,73
Нормобласти | 26,02±2,74 | 27,21±2,91 | 30,6±3,84
Еритроїдний росток | 30,12±2,02 | 31,21±2,41
Р10,05 | 35,41±3,73
Р10,05 Р20,05
Лімфобласти | 1,82±0,24 | 2,01±0,13 | 1,23±0,51
Лімфоцити | 19,13±2,20 | 24,42±2,31 | 32,21±3,12
Лімфоїдний росток | 20,95±2,44 | 26,41±2,43
Р10,05 | 33,44±3,63
Р10,05 Р20,05
Голоядерні клітини | 1,310,08 | 1,130,05 | 1,520,07
Примітка: Р1 – вірогідність випадкових розходжень з даними до охолодження; Р2 вірогідність випадкових розходжень з даними після швидкого двоступінчастого заморожування та відмивання від кріопротектора
Найбільш стійкими виявилися клітини еритроїдного ряду – нормобласти, найменш – мієлоїдного – гранулоцити. Зменшення молярності розчину, що відмиває, до 0,75М призводило до більш вираженого зниження кількості клітин мієлоїдного типу, і в першу чергу - гранулоцитів, що сприяло відносному збільшенню лімфоїдних та еритроїдних клітин.
Проведені експерименти щодо вивчення фагоцитарної активності гранулоцитів після швидкого двоступінчастого заморожування кісткового мозку і одноразового відмивання від кріопротектору 0,75М і 1,5М водним розчином NaCl підтвердили теоретичні розрахунки, показавши, що вона залежить від молярності розчину, що відмиває. Так, при відмиванні 0,75М розчином NaCl відзначене пригничення даної функції гранулоцитів було вищим, ніж при відмиванні 1,5М розчином. І хоча ці показники вірогідно і відрізнялися від контрольних величин нативного кісткового мозку, було встановлено, що при відмиванні клітин 1,5М-ним розчином ФІ знижувався на 16,782,71%, ФЧ - на 29,752,81%, АЧГр – на 29,752,90%, а АПФАгр – на 49,282,61%. В той же час при відмиванні 0,75М розчином NaCl показники фагоцитарної активності знизилися ще більше: ФІ - на 26,462,72%, ФЧ – на 46,972,15%, АЧГр – на 59,642,53%, АПФАГр – на 70,442,32% (рис. 6).
Рис. 6 Фагоцитарна активність гранулоцитів після кріоконсервування і відмивання від кріопротектора
Збереження стовбурових і колонієутворюючих клітин кісткового мозку (КУОс) після кріоконсервування є інтегральним і найбільш важливим показником його ефективності. На цій підставі було вивчено вплив кріоконсервування методом швидкого двоступінчастого заморожування з наступним відмиванням від кріопротектору на колонієутворюючу здатність, проліферативну активність і диференціювання КУОс. Отримані експериментальні дані представлені в таблиці 3.

Завантажити цю роботу безкоштовно

Пролистати роботу: 1  2  3  4  5  6  7  8  9  10  11 
Реферат на тему: Теоретичне обгрунтовування та експерИментальна перевірка ефективності швидкого двоступінчастого заморожування

BR.com.ua © 1999-2019 | Реклама на сайті | Умови використання | Зворотній зв'язок